400-666-3332 会员登录 购物车
左侧二维码
RNA提取纯化 您现在的位置是:北京康润诚业生物科技有限公司 > GenStar产品
P118 TRIGene
货号
产品规格
销售价(RMB)
库存
数量
小计(RMB)
加入购物车
P118-01
20 ml
128
现货
128
P118-05
100 ml
460
现货
460

【产品概述】

TRIGene是基于TriZol原理制备的一种通用总RNA提取试剂。该方法简便、快捷,适用于动植物细胞、组织、酵母细胞以及细菌的总RNA抽提,也可从同一样品中同时提取DNA和蛋白质。其原理是利用异硫氢酸胍/酚/氯仿法,快速裂解细胞,溶解细胞内含物,抑制核酸酶,有效防止RNA在提取过程中的降解。加入氯仿后,溶液分为水相和有机相。RNA保留在上层水相中,分离后可用异丙醇沉淀回收;DNA存在于中间层,可用乙醇沉淀回收;蛋白质在下层有机相中,用异丙醇沉淀可回收。获得的DNA可用作标准参照,比较不同样品的RNA得率。TRIGene提取的总RNA产量大、纯度高,无基因组DNA和蛋白质污染,可直接用于RT-PCR、Northern blot、dot blot、polyA筛选、体外翻译、RNase保护实验和分子克隆等一系列操作。

【保存条件】

4℃避光密闭保存,有效期一年

【RNA提取常见问题及解决方案】

问题 可能原因 解决方案
产量低
样品裂解或匀浆处理不彻底
加入TRIGene后应彻底匀浆,植物和酵母细胞应在液氮中充分研磨
RNA终产物溶解不完全
注意不使沉淀的RNA过分干燥;对难溶的沉淀可于50-60℃加热5分钟助溶
RNA降解 组织或细胞样品取出后没有马上处理或于-80℃冷冻
采用新鲜材料;不能及时提取RNA的样品应于-80℃或液氮冷冻保存
提取的RNA长期保存置于-20℃
应置于-80℃长期保存
细胞在胰酶处理时被破坏
避免使用胰蛋白酶,直接使用TRIGene裂解细胞
溶液或离心管未经RNase去除处理
氯仿抽提之后的所有步骤都需采用无RNase的试剂和容器
电泳时使用的甲酰氨pH值低于3.5
正确配制RNA变性凝胶
OD260/280<1.65
检测吸光度时,RNA样品溶于水中
使用TE稀释RNA样品进行检测
样品匀浆时的TRIGene用量过少
通常向每50 mg组织、每10 cm2培养面积、或每5~10×106细胞中加入1 ml TRIGene;每0.25 ml体液样品中加入0.75 ml TRIGene LS
匀浆后样品未在室温放置5分钟
匀浆后室温放置5分钟
苯酚污染(270 nm强吸收峰)
4℃下离心;小心吸取上层水相,避免混有有机相;对污染的样品使用乙醇沉淀去除苯酚
最后得到的RNA沉淀未完全溶解
避免使用真空干燥离心机干燥RNA沉淀;对难溶的沉淀可于50-60℃加热5分钟助溶
OD260/280>2.0 RNA降解使OD260值升高
尽可能采取一切避免RNA降解的措施
DNA 污染 样品匀浆时的TRIGene用量过少
通常向每50 mg组织、每10 cm2培养面积、或每5~10×106细胞中加入1 ml TRIGene;每0.25 ml体液样品中加入0.75 ml TRIGene LS
起始样品中含有溶剂(如乙醇,DMSO等)、强缓冲液或碱性溶液
使用DNase I处理RNA溶液



康润生物,伴您生命科学成功之路         京ICP备11028165号          400-666-3332
北京市昌平区生命园路9号院  仪器楼三层  京公网安备案11011402000083号