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T168 EZ-T™ Cloning Vector
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T168-101
20 µl
210
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210

EZ-T载体是高效、便利的PCR产物克隆专用载体。该载体是基于pBlueScript II SK(+) 质粒,在EcoRI识别位点处添加了适当序列,经酶切处理后获得具有突出的3’-端T碱基的线性载体。EZ-T载体可与TaqTth 等DNA聚合酶催化的携带3’-端A碱基的PCR产物互补连接,以利于下一步克隆或测序。由PfuPwo、Vent或KOD等高保真DNA聚合酶催化反应的PCR产物,也可经Taq DNA聚合酶添加3’-端A碱基后,与EZ-T载体连接。
EZ-T载体多克隆位点区插入位点两侧均设计了EcoRI酶切位点,因此既可使用EcoRI单酶切,也可使用其他适当的内切酶双酶切,释放插入片段进行检测或亚克隆。EZ-T载体不含NdeI或NcoI限制性内切酶位点,故可用于克隆含上述酶切位点的基因。DNA测序建议使用M13 Forward和M13 Reverse或T7 promoter和T3 promoter 通用型引物。

用途

·  PCR产物测序和亚克隆
·  利用lac promoter进行基因表达

特点


  • 阳性率高:高纯度酶切型线性T载体,重组效率更高,蓝斑率低于10%
  • 方便灵活:可于4℃运输;可与任何品牌T4DNA连接酶配合使用
  • EZ-T™载体含多个常用酶切位点,利于无适当酶切位点DNA片段的亚克隆
  • 插入对照:提供纯化的PCR片段作为阳性对照
  • 无NdeI或NcoI位点,利于重组表达基因的亚克隆
  • 蓝白筛选:高表达活性的b-半乳糖苷酶,显色更快更深
  • 批次稳定遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测


产品组分

EZ-TTM Cloning Vector(40 ng/μl)
20 μl
Control Insert(40 ng/μl) 5 μl

保存条件

−20℃保存一年,避免反复冻融,单次用量少时应适量分装

质量控制

使用GenStar T4 DNA连接酶进行连接时,当插入DNA对照(800 bp)与载体的摩尔比例为3:1时,蓝斑率低于5%,有90%以上的白色菌落含插入DNA对照片段。经测序确认多克隆酶切位点及T碱基存在。

EZ-T载体环形图谱

EZ-T™载体的多克隆位点区序列

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