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T113 StarMut XL Site-directed Mutagenesis Kit
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T113-01
10 rxn
1382
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1382

本产品是StarMut Site-directed Mutagenesis Kit(Cat. No. T111-01)的升级产品,采用保真性能和扩增效率俱佳的StarMut XL Enzyme,能够快速扩增15 kb以下的质粒DNA,最大限度地降低非目的突变的发生率;其合成速度为15~30 sec/1 kb,大大缩短了反应时间。该方法操作简单快速,突变阳性率高,对引物设计的要求相对宽松、灵活。严格按说明书操作,6个以下连续碱基的突变率可达90%以上,最多可实现21个连续碱基的插入或删除。通过与T4 DNA连接酶联合使用,本试剂盒可实现更长片段的插入或删除。

用途
·  15 kb以下质粒的单个或多个邻近碱基的置换(substitution)、缺失(deletion)、或插入(insertion)

特点
· 高效快速:采用极高保真性能和极高扩增效率的DNA聚合酶,10 kb质粒突变反应最多只需2.5小时
· 操作简单:采用一步PCR法,不需要磷酸化引物,不需要连接反应,不需要特殊菌株
· 阳性率高:6个以下连续碱基的突变率可达90%以上
· 质控对照:提供Control Plasmid和Control Primers,通过X-gal琼脂平板呈色变化监控反应各组分的性能
· 提供针对高GC模板的High-GC Additive

产品组分
StarMut XL Enzyme                                                         8 μl
5 x StarMut XL Reaction Buffer                                      100 μl
High-GC Additive*                                                          30 μl
StarMut dNTPs                                                              25  μl
Dpn I (10 U/ml)                                                              12 μl
Control Plasmid (5 ng/ml)                                                10 μl
Control Primers (10 μM of each)                                               10 μl
ddH2O                                                                            1 ml

保存条件
-20℃恒温保存一年

使用方法
1. 设置PCR反应体系:
Template Plasmid (5~10 ng/μl)                                     1 μl
5 x StarMut XL Reaction Buffer                                     5 μl
Primer Mixture (10 μM of each)                                    1 μl
StarMut dNTPs                                                           2 μl
ddH2O                                                            补足至25 μl
2. 加入 0.5 μl StarMut XL Enzyme混匀,置于PCR仪中
3. 按以下设置进行PCR:

4. 加入1 μl Dpn I,37℃温育≥1 hr
5. 转化、培养


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