400-666-3332 会员登录 购物车
左侧二维码
常规克隆 您现在的位置是:北京康润诚业生物科技有限公司 > GenStar产品
T169 EZ-T™ Simple Fast Ligation Kit
货号
产品规格
销售价(RMB)
库存
数量
小计(RMB)
加入购物车
T169-10
20 rxn
580
现货
580

本产品是高效、便利的PCR产物克隆专用试剂盒。EZ-TTM Simple载体是基于pBlueScript II SK(+) 质粒,通过对其多克隆位点区序列进行改造,去除了多克隆位点,再经酶切处理后获得具有突出的3’-末端T碱基的线性载体。EZ-TTM Simple载体不含绝大多数常用的限制性内切酶位点以及重组表达常用的NdeI和NcoI等位点,因而更适合用于含酶切位点的PCR产物的插入。该载体可与Taq Tth 等DNA聚合酶催化的携带3· -端A碱基的PCR产物互补连接,以利于下一步克隆或测序。由PfuPwo 或KOD等高保真DNA聚合酶催化反应的PCR产物,也可经Taq DNA聚合酶添加3· -端A碱基后,与EZ-T™ Simple Vector连接。DNA测序建议使用M13 Forward和M13 Reverse,T7promoter和T3 promoter 通用引物。
本试剂盒提供预混有T4 DNA连接酶和2x Ligation Buffer 25下5分钟完成连接反应。试剂盒还提供一800 bp PCR产物(Control Insert)作为连接反应的阳性对照。用本试剂盒克隆约1 kb大小PCR片段的蓝斑率(即自连率)通常低于5%,白斑插入阳性率可高达90%以上。受载体自身大小的限制,2.5 kb以上PCR产物的克隆阳性率低于30%。

用途
• PCR产物的测序
• 含酶切位点PCR产物的亚克隆
• 利用lac promoter进行基因表达

特点

• 阳性率高:高纯度酶切型线性T载体,连接效率更高,蓝斑率低于10%
• 方便快捷:预混连接反应体系,最快5分钟实现连接,无需纯化,直接转化
• EZ-T™ Simple载体无常用酶切位点,利于含酶切位点基因克隆
• 无NdeI或NcoI位点,便于重组表达基因的克隆
• 提供纯化的PCR片段作为阳性质控对照
• 蓝白筛选:高表达活性的β-半乳糖苷酶,显色更快更深
• 批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测
产品组分

EZ-T™ Simple Cloning Vector(40 ng/μl
20 μl
Control Insert(40 ng/μl) 5 μl
EZ-T™ DNA Ligase 12 μl
2x Ligation Buffer 300 μl

保存条件

-20℃恒温保存一年,避免反复冻融,单次用量少时应适量分装

质量控制
插入DNA对照与载体连接的摩尔比例为3:1时,蓝斑率低于5%,有90%以上的白色菌落含插入DNA对照片段。经测序确认多克隆酶切位点及T碱基存在。

EZ-T™ Simple载体环形图谱

EZ-T™ Simple载体的多克隆位点区序列



【相关产品】

产品 货号 页码
2×Taq PCR StarMix with Loading Dye A012-01 013
StarTaq DNA Polymerase A108-01 026
StarPrep Gel Extraction Kit D205-01 105
DH5α Chemically Competent Cells S101-01 198
TOP10 Chemically Competent Cells S102-01 198


康润生物,伴您生命科学成功之路         京ICP备11028165号          400-666-3332
北京市昌平区生命园路9号院  仪器楼三层  京公网安备案11011402000083号