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A161 ExPfu DNA Polymerase
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A161-01
150 U
321
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321
A161-05
150 U×5
1428
现货
1428
A161-10
150 U×10
2570
现货
2570

【产品概述】

ExPfu高保真DNA聚合酶是一种基于Pfu改造的混合酶,具有5’®3’ DNA 聚合酶活性和3’®5’的外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象,其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase35倍,反应速度视模板复杂程度约为2-4 kb/min。对于一般性模板可以保证10 kb的扩增长度。本产品适用于对保真性要求高的DNA长片段的快速扩增,如基因克隆、测序、定点突变、SNP分析等。使用ExPfu高保真DNA聚合酶扩增得到的PCR产物无3’端突出碱基,不可直接用于TA克隆。


【保存条件】 

-20保存,保质期24个月。  


【注意事项】

  1. 50 μl 的反应体系中ExPfu使用量为0.5-1.5 U,不要超过2 U
  2. ExPfu高保真DNA聚合酶的3’®5’的外切酶活性可降解引物,用酶量过多会导致引物部分或完全降解,电泳检测时产生弥散带型或无扩增产物。故在反应体系中应先加dNTP,再加酶,并立即进行PCR反应。
  3. ExPfu高保真DNA聚合酶扩增反应时应使用高质量的dNTPCat# A113),不推荐使用dUTP和其它可诱导产生dUTP或类似物的试剂,通常使用终浓度各为0.2 mM dNTP就可以达到比较好的效果。
  4. ExPfu扩增后的PCR产物经过纯化后,可直接与经去磷酸化的平末端目标载体连接,也可先连接到线性平末端克隆载体上(如EZ-Blunt Blunt-end Ligation KitCat# T170),再经亚克隆转移至目标载体。如果需要与线性T载体连接,应先纯化再对PCR产物的3’端添加A碱基,加A反应可使用EZ-T A-Tailing KitCat# T173)。

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