400-666-3332 会员登录 购物车
左侧二维码
DNA Polymerases 您现在的位置是:北京康润诚业生物科技有限公司 > GenStar产品
A124 LongTaq DNA Polymerase
货号
产品规格
销售价(RMB)
库存
数量
小计(RMB)
加入购物车
A124-01
500 U
275
现货
275
A124-05
500 U×5
1257
现货
1257
A124-10
500 U×10
2203
现货
2203
GenStar LongTaq DNA Polymerase系在Taq酶的基础上,按最佳比例混合了具有3'→5'端DNA外切酶活性(即校读活性)的高保真DNA聚合酶,并且配备精心优化的反应缓冲液,可高效扩增以基因组DNA、cDNA、质粒等为模板的10 kb以上的长片段DNA。本产品适用于构建基因图谱、克隆长片段DNA等。使用LongTaq DNA聚合酶扩增的一部分PCR产物3'末端附有突出的A碱基,可直接进行T载体克隆,加A处理后可提高TA克隆效率。虽然LongTaq DNA Polymerase对低于10 kb的DNA片段的扩增效率接近HiFiTaq DNA Polymerase(Cat No. A116),但其保真性略低于HiFiTaq DNA Polymerase。因此在扩增对保真性要求较高的10 kb以下的目的片段时,建议根据片段大小和模板特点选择适当的高保真DNA聚合酶。
用途
·   超长DNA片段扩增
特点
·  超长片段扩增:基因组模板可扩增10 kb以上长片段;l DNA模板可扩增30 kb片段
·  较高保真性:不含PCR反应增强剂,最大限度地保持保真性
·  批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测
产品组分
LongTaq DNA Polymerase (5 U/μl)                      100 μl
10 × LongTaq PCR Buffer                                    1 ml
保存条件
-20℃恒温保存一年
活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃、30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制
·   以10 pg l DNA为模板,可高效扩增30 kb的DNA片段
·   无内切酶、外切酶污染
·   PCR检测无残留宿主基因组DNA
·   室温存放一周无明显活性降低
FAQ
Q1: LongTaq酶有什么优势?
A1:LongTaq酶是由具有高效扩增能力的Taq酶与具有校读活性的高保真酶按最佳比例混合而成的。在适当的缓冲体系中,引物的延伸主要由Taq酶高效催化完成;一旦出现错配后,高保真酶即发挥其校对功能,通过其3'→5'端DNA外切酶活性去除错配碱基,使DNA链继续延伸。因此LongTaq酶将两种酶的优势互补,在不降低扩增效率的情况下提升了保真性。
Q2: LongTaq与HiFiTaq DNA聚合酶有什么不同?
A2:LongTaq 和HiFiTaq DNA聚合酶都是混合型酶,但缓冲液成分不同。LongTaq适合于扩增超长片段,在扩增10 kb以上片段的能力上明显优于HiFiTaq,但保真性有所损失。HiFiTaq通常用于对扩增保真性要求较高、而Pfu等高保真酶无法扩增或扩增效率低下的目标片段。
Q3: 长片段PCR成功的关键因素?
A3: 模板DNA的纯度和完整性是长片段PCR成功的关键。扩增10 kb以上的DNA片段时,应采用高质量的DNA提取试剂或试剂盒制备模板DNA,而不能采用加热或蛋白酶消化法粗提的DNA。同时引物的设计也至关重要。建议引物的长度在30个碱基左右,以保证其特异性。
Q4: LongTaq酶的PCR产物适合做TA克隆吗?
A4: 商业化T载体通常在3~4 kb之间,当插入片段长度接近或大于载体大小时,连接效率将显著降低。LongTaq通常用于扩增10 kb以上的长片段,因此不适于普通T载体克隆。长片段PCR产物可通过酶切直接连接到较大的目标载体上,或者通过TA克隆方法连接到长片段PCR产物专用载体上(如需相关资料可来电索取)。
应用实例



康润生物,伴您生命科学成功之路         京ICP备11028165号          400-666-3332
北京市昌平区生命园路9号院  仪器楼三层  京公网安备案11011402000083号