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A151 SuperStar High-Fidelity DNA Polymerase
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A151-02
150 U
960
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960

【产品概述】

SuperStar超保真DNA聚合酶是一种混合酶,具有5’®3’ DNA 聚合酶活性和3’®5’的外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象,在标准缓冲液中其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase48倍、Pfu DNA Polymerase6倍。同时该酶还具有快速的DNA合成速度,约相当于普通Taq DNA Polymerase4倍、Pfu DNA Polymerase8倍。该酶合成能力很强,即使是复杂的模板,也能快速准确的完成反应,尤其适用于对保真性要求高的DNA长片段的快速扩增,如基因克隆、测序、定点突变、SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。使用SuperStar超保真DNA聚合酶扩增得到的PCR产物无3’端突出碱基,不可直接用于TA克隆。


【保存条件】

-20保存,保质期24个月。

 

【注意事项】

  1. 50 μl 的反应体系中SuperStar超保真DNA聚合酶使用量为0.5-1.0 U,不要超过2 U
  2. SuperStar超保真DNA聚合酶扩增时延伸速度约为15-30 s/kb,不要超过1 min/kb。应根据扩增产物的长度和模板的复杂性设置相应的延伸时间,复杂性较低时(例如:质粒、λDNA)可用15 s/kb的延伸时间;复杂性较高的基因组DNA模板,延伸时间则应为30 s/kb;对于有些cDNA模板,延伸时间可以增加到40 s/kb
  3. SuperStar超保真DNA聚合酶的3’®5’的外切酶活性可降解引物,用酶量过多会导致引物部分或完全降解,电泳检测时产生弥散带型或无扩增产物。故在反应体系中应先加dNTP,再加酶,并立即进行PCR反应。
  4. SuperStar超保真DNA聚合酶扩增时,当引物长度大于20个碱基,复性温度为Tm+3;当引物小于20个碱基,复性温度为最低的Tm值。建议使用引物终浓度为0.5 μM,如果需要可在0.2-1.0 μM之间,比Taq酶高。
  5. SuperStar超保真DNA聚合酶具有极高的热稳定性,变性温度可以高于98。我们推荐大多数模板的初始变性温度是98,变性时间为30 s。
  6. SuperStar超保真DNA聚合酶扩增反应时应使用高质量的dNTPCat# A113),不推荐使用dUTP和其它可诱导产生dUTP或类似物的试剂,通常使用终浓度各为0.2 mM dNTP就可以达到比较好的效果。
  7. SuperStar超保真DNA聚合酶PCR产物经过纯化后,可直接与经去磷酸化的平末端目标载体连接,也可先连接到线性平末端克隆载体上(如EZ-Blunt Blunt-end Ligation KitCat# T170),再经亚克隆转移至目标载体。如果需要与线性T载体连接,应先纯化去除SuperStar High-Fidelity DNA Polymerase后,再对PCR产物的3’端添加A碱基,加A反应可使用EZ-T A-Tailing KitCat# T173)。  
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