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C629 Human CRP ELISA Kit
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C629-01
48 t
1820
现货
1820
C629-02
96 t
2800
现货
2800

【产品概述】

本试剂盒用于定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中天然和重组CRP浓度。CRP是机体受到微生物入侵或组织损伤等炎症性刺激时肝细胞合成的急性期蛋白,可在24至48小时内增加1000倍。与人的CRP不同,小鼠的CRP表达水平极低。CRP蛋白由206个氨基酸组成,大小约23kDa,CRP属于穿透素家族成员之一,由5个相同的亚单位以非共价键形式结合,形成对称的环状五球体,中间环绕一孔型结构,其凹面含有配体结合位点。 IL-6、IL-1β和糖皮质激素能够诱导肝CRP合成和释放。

CRP能与磷脂酰胆碱(phosphory,PC)、脂蛋白、脂多糖,染色质、半乳糖、胆固醇等多重配体结合。这些配体是细胞、真菌或人类细胞壁的成分,当这些物质由入侵微生物或受到损伤自身细胞释放出来时,CRP就可以通过Ca2+或其本身的阳离子结合部位与之结合,经过经典途径激活补体,清除外来致病因子及损伤细胞,为组织修复创造条件。与配体结合后,CRP激活补体级联反应,也可以与FcγRI(CD64)和FcγRIIA(CD32a)结合,活化吞噬细胞作用。

另外,CRP还能与T细胞结合,通过后者调节免疫;也能一直血小板聚集等。一般认为,CRP是机体防御系统中的一员。

本实验采用双抗体夹心ELISA。用抗人CRP单克隆抗体预包被酶标板,加入适度稀释的样本和标准品,其中的CRP会与其单抗结合,洗去游离成分;加入生物素化的抗人CRP抗体,抗人CRP抗体与结合在单抗上的人CRP结合而形成免疫复合物,洗去游离的成分;加入辣根过氧化物酶标记的亲合素,生物素与亲合素特异性结合,洗去未结合的酶结合物;加入显色剂,若反应孔中有CRP,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色;加终止液变黄。在450nm下测OD值,CRP浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线计算出标本中CRP浓度。


【产品规格及组分】

货号及规格

C629-01(48 Tests)

C629-02(96 Tests)

保存条件

1a标准品

1支(冻干)

2支(冻干)

4℃

1b标准品和标本稀释液

2瓶

4瓶

4℃

2a浓缩生物素化抗体100×

1支

2支

4℃

2b生物素化抗体稀释液

1瓶

1瓶

4℃

3a浓缩酶结合物100×

1支

2支

4℃(避光)

3b酶结合物稀释液

1瓶

1瓶

4℃

4浓缩洗涤液20×

1瓶

1瓶

4℃

显色剂

1瓶

1瓶

4℃(避光)

终止液

1瓶

1瓶

4℃

抗体包被板条

8×6

8×12

4℃

封板胶纸

2张

4张

4℃

说明书

1份

1份

 

【注意事项】

1. 试剂盒使用前请保存在2-8℃。除复溶后的标准品,其他成分不可冻结。

2. 浓缩生物素化抗体,浓缩酶结合物体积小,运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或1000 rpm离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。

3. 为避免交叉污染请使用一次性吸头。

4. 终止液和显色剂具腐蚀性,避免皮肤及粘膜直接接触,一旦接触到这些液体,请尽快用大量水冲洗。

5. 使用干净的塑料容器配制洗涤液,使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7. 不要用其它来源的试剂混合或替代该产品的组分,不同批号的试剂盒组份不能混用,请在有效日期内使用本产品。

8. 在试验中标准品和样本检测时建议作双复孔或三复孔,加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应孔孵育的时间一样。

9. 充分混匀对反应结果尤为重要,最好使用微量振荡器(使用最低频率进行振荡)。

10. 避免操作过程中酶标板干燥,干燥会使酶标板上生物成分迅速失活,影响实验结果。

11. 适当的稀释样品,使样品值落在标准曲线范围内,根据待测因子含量高、中、低的不同,建议采用1:100、1:10、1:2稀释样品。

12. 如果样品OD值高于最高标准,适当增加稀释度并重复检测。

13. 标准品稀释液,操作人,移液方式,洗涤方法,孵育时间及温度,试剂盒批次的不同均可能会导致结果的差异。

14. 此法可有效的消除可溶性受体、结合蛋白以及生物样品中的其他因素的干扰。


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