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C645 Human HGF ELISA Kit
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C645-01
48 t
1820
现货
1820
C645-02
96 t
2800
现货
2800

【产品概述】

肝细胞生长因子(HGF),也被称为肝细胞生成素A,促进多种类型的细胞进行有丝分裂,包括内皮细胞和上皮细胞,黑素细胞和角质形成细胞。它与分散因子,成纤维细胞衍生的可溶性因子作用完全相同,在单层细胞培养中通过刺激细胞迁移促进上皮细胞和血管内皮细胞的分离。HGF 分泌成非活性的单链前体形式,通过肝细胞生长因子激活剂转化为活性形式的异二聚体。


肝细胞生长因子,是S1 肽酶的血纤维蛋白溶酶原亚家族的一种多效蛋白。它是一个多分子结构,包括一个N 端PAN/APPLE 样结构域,四个Kringle 结构域,和一个不具有检测蛋白酶活性的丝氨酸蛋白酶样结构域。人肝细胞生长因子分泌为一个非活性的具有728 个氨基酸(aa)的单链肽。通过丝氨酸蛋白酶切割第四个Kringle 结构域,形成一个以二硫键链接的60 kDa 的α链和30 kDa 的β链的HGF。选择性剪切产生的肝细胞生长因子亚型缺乏蛋白酶样结构域和不同数量的Kringle 结构域。


人肝细胞生长因子与牛、狗、猫、小鼠和大鼠肝细胞生长因子的氨基酸同源性约有91%-94%。HGF 结合硫酸乙酰肝素蛋白多糖,广泛表达受体酪氨酸激酶,HGF R / c-Met。HGF 依赖c-Met 的激活在多种人类癌症的发展中有关联。HGF 通过诱导细胞分散和小管的增生调节上皮细胞形态。HGF 通过选择性增加α2 基因转录,上调了上皮细胞中整合素α2β1。这种整合素作为I 型胶原受体,其封锁破坏上皮细胞分支小管的增生。HGF 通过黏连蛋白-1α胞外域脱落的感应也能改变上皮细胞形态。在甲状腺中,肝细胞生长因子诱导甲状腺细胞的增殖、运动、和分化的损失,抑制TSH 刺激碘摄取。HGF 在受损心肌中促进心脏干细胞的运动。


本实验采用双抗体夹心ELISA。用抗人HGF 单克隆抗体预包被酶标板,加入适度稀释的样本和标准品,其中的HGF 会与其单抗结合,洗去游离成分;加入生物素化的抗人HGF 抗体,抗人HGF 抗体与结合在单抗上的人HGF 结合而形成免疫复合物,洗去游离的成分;加入辣根过氧化物酶标记的亲合素,生物素与亲合素特异性结合,洗去未结合的酶结合物;加入显色剂,若反应孔中有HGF,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色;加终止液变黄。在450nm 下测OD 值,HGF 浓度与OD450之间呈正比,可通过绘制标准曲线计算出标本中HGF 浓度。


【产品规格及组分】

货号及规格

C645-01(48 Tests)

C645-02(96 Tests)

保存条件

1a标准品

1支(冻干)

2支(冻干)

4℃

1b标准品和标本稀释液

1瓶

1瓶

4℃

2a浓缩生物素化抗体100×

1支

2支

4℃

2b生物素化抗体稀释液

1瓶

1瓶

4℃

3a浓缩酶结合物100×

1支

2支

4℃(避光)

3b酶结合物稀释液

1瓶

1瓶

4℃

4浓缩洗涤液20×

1瓶

1瓶

4℃

显色剂

1瓶

1瓶

4℃(避光)

终止液

1瓶

1瓶

4℃

抗体包被板条

8×6

8×12

4℃

封板胶纸

2张

4张

 

说明书

1份

1份

 

【注意事项】

1. 试剂盒保存在2~8℃,除复溶后的标准品,其它成分不可冷冻。

2. 浓缩生物素化抗体、浓缩酶结合物装量极少,运输中颠簸和可能的倒置会使液体沾到管壁或瓶盖。使用前请离心处理以使附着于管壁或瓶盖的液体沉积到管底。

3. 为避免交叉污染请使用一次性吸头。

4. 终止液和显色剂具腐蚀性,避免皮肤及粘膜直接接触,一旦接触到这些液体,请尽快用大量水冲洗。能混用,请在有效日期内使用本产品。

5. 使用干净的塑料容器配制洗涤液,使用前充分混匀试剂盒里的各种成分及样品。

6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7. 不要用其它来源的试剂混合或替代该产品的组分,不同批号的试剂盒组分不能混用,请在有效日期内使用本产品。

8. 在试验中标准品和样本检测时建议作双复孔或三复孔,加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应孔孵育的时间一样。

9. 充分混匀对反应结果尤为重要,最好使用微量振荡器(使用最低频率进行振荡)。

10. 避免操作过程中酶标板干燥,干燥会使酶标板上生物成分迅速失活,影响实验结果。

11. 适当的稀释样品,使样品值落在标准曲线范围内,根据待测因子含量高、中、低的不同,建议采用1:100、1:10、1:2稀释样品。如果样品OD值高于最高标准,适当增加稀释度并重复检测。

12. 标准品稀释液,操作人,移液方式,洗涤方法,孵育时间及温度,试剂盒批次的不同均可能会导致结果的差异。

13.   此法可有效的消除可溶性受体、结合蛋白以及生物样品中的其他因素的干扰。


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