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C901 Swine IFN-γ ELISA Kit
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C901-01
48 t
1820
现货
1820
C901-02
96 t
2800
现货
2800

【产品概述】

       γ干扰素(IFN-γ,又称为II型干扰素)是一种重要的免疫调节细胞因子,最初是根据其抗病毒活性而发现的(1)。它在宿主的防御系统中起关键作用,具有抗病毒、抗增殖和免疫调节的活性。在许多细胞类型中,IFN-γ诱导细胞因子的产生,并增强很多膜蛋白的表达,包括I和II类MHC抗原、Fc受体白细胞凝集分子和B7家族抗原。IFN-γ还是一种巨噬细胞活化因子。它增强B细胞分泌免疫球蛋白,并直接作用于IgG的生成。IFN-γ还通过抑制Th2分化和诱导Th1,而影响T辅助细胞的表型形成。此外,IFN-γ通过诱导CXCL9、CXCL10、CCL2、CCL3、CCL4和CCL5促进单核细胞毒性。许多细胞都产生II FN-γ,包括树枝状表皮/γδT细胞、角化细胞、外周血γδT细胞、肥大细胞、神经细胞、CD8+ T细胞、巨噬细胞、B细胞、嗜中性粒细胞、NK细胞、CD4+ T 细胞和睾丸精细胞。IL-12、IL-18、IL-23和IL-27相互作用,促进IFN-γ的产生。猪IFN-γcDNA编码了166个氨基酸残基的蛋白质,该蛋白质包括20个氨基酸的疏水引导肽,之后剪切生成146个氨基酸的成熟IFN-γ。 猪IFN-γ应该是非共价结合的同型二聚体。在成熟片段,猪IFN-γ分别与人、天竺鼠、小鼠、大鼠和狗具有60%、55%、41%、42%、72%和72% 的氨基酸序列同源性。

      功能性的IFN-γ受体复合体由两个亚基组成。α亚基(IFN-γR1)与IFN-γ的结合亲和性很高,并且具有种属特异性。β亚基[IFN-γR2,又称为辅助因子-1 (AF-1)]与IFN-γ的亚基结合也具有种属特异性,并在JAK-STAT通路中介导信号传导。虽然功能性受体包括同型二聚体IFN-γ与两个α链和两个β链的组合,但也有报道,还有其他亚基也起到作用。α链在许多细胞类型中持续表达,而β链的表达与IFN-γ应答情况相关,受到细胞的严格调控。

       本实验采用双抗体夹心ELISA。用抗猪IFN-γ单克隆抗体预包被酶标板,加入适度稀释的样本和标准品,其中的IFN-γ会与其单抗结合,洗去游离成分;加入生物素化的抗猪IFN-γ抗体,抗猪IFN-γ抗体与结合在单抗上的猪IFN-γ结合而形成免疫复合物,洗去游离的成分;加入辣根过氧化物酶标记的亲合素,生物素与亲合素特异性结合,洗去未结合的酶结合物;加入显色剂,若反应孔中有IFN-γ,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色;加终止液变黄。在450 nm下测OD值,IFN-γ浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线计算出标本中IFN-γ浓度。



【产品规格及组分】

货号及规格

C901-01(48 Tests)

C901-02(96 Tests)

保存条件

1a标准品

1支(冻干)

2支(冻干)

4℃

1b标准品和标本稀释液

1瓶

1瓶

4℃

2a浓缩生物素化抗体100×

1支

2支

4℃

2b生物素化抗体稀释液

1瓶

1瓶

4℃

3a浓缩酶结合物100×

1支

2支

4℃(避光)

3b酶结合物稀释液

1瓶

1瓶

4℃

4浓缩洗涤液20×

1瓶

1瓶

4℃

显色剂

1瓶

1瓶

4℃(避光)

终止液

1瓶

1瓶

4℃

抗体包被板条

8×6

8×12

4℃

封板胶纸

2张

4张

4℃

说明书

1份

1份

 


【注意事项】

1. 试剂盒使用前请保存在2-8℃。除复溶后的标准品,其他成分不可冻结。

2. 浓缩生物素化抗体,浓缩酶结合物体积小,运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或1000 rpm离心

1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。

3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶完全溶解后再配制洗涤液。

4. 若需要分次使用标准品,在标准品复溶后应按每一次用量分装,将其放在-20或-70℃贮存。避免反复冻融。

5. 不同批号的试剂盒组份不能混用(洗涤液和反应终止液除外)。

6. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要,最好使用微量振荡器(使用最低频率),如无微量振荡器,可在反应前手工轻轻晃动酶标板,使加入孔中的反应液混匀。

7. 酶免试验中标准品和样本检测时建议作复孔。


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