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C202 StarGlow Annexin V-Alexa Fluor 647/PI Apoptosis Detection Kit
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C202-01
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产品概述

细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性,对PS有高度的亲和性。因此,该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PSPS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。因此,可以采用Annexin VPI双染的方法,通过流式检测细胞早期凋亡。

产品货号规格及组分】

货号

C202-01

C202-05

C202-10

规格

20 rxn

50 rxn

100 rxn

rh Annexin V/Alexa Fluor 647

100 μl

250 μl

500 μl

Propidium Iodide,PI(20 μg/ml)

200 μl

500 μl

1000 μl

4x Annexin V-Alexa Binding Buffer

4 ml

10 ml

20 ml

产品说明书

1

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保存条件

低温运输;2-8避光保存;勿冰冻。

使用方法

标记的Annexin V可结合流式细胞仪用于检测细胞外膜上的磷酯酰丝氨酸,操作流程如下:

1. 用去离子水按1:4稀释结合缓冲液(4ml结合缓冲液+12ml去离子水);

2. 4预冷的PBS洗细胞两次,用250 μl结合缓冲液重新悬浮细胞,调节其浓度为1 x106/ml

3. 100 μl的细胞悬液与5ml流式管中,加入5μl Annexin V/Alexa Fluor 647,室温避光孵育5分钟;

4. 加入10μl 20 μg/ml的碘化丙啶溶液;

5. 在反应管中加400μl PBS,流式细胞仪(FACS)分析。(注:消化细胞时不能用含EDTA的胰酶)

【实验参考图片

Jurkat细胞经紫外照射诱导凋亡后用Annexin V-Alexa Fluor 647/PI双染流式分析图谱



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