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A187 SuperStar Max DNA Polymerase Kit
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A187-01
100U
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【产品概述】

SuperStar Max 超保真DNA聚合酶是在SuperStar Plus超保真DNA聚合酶基础上开发出来的高性能DNA聚合酶,具有更出色的扩增成功率和扩增效率。本酶具有5’®3’ DNA聚合酶活性和3’®5’的外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象,其保真度约相当于普通Taq DNA聚合酶的52倍。反应速度视模板复杂程度约为2-4 kb/min。对于一般性模板可以保证15 kb的扩增长度。本产品适用于对保真性要求高的DNA片段的快速扩增,如基因克隆、测序、定点突变、SNP分析等。使用SuperStar MAX超保真DNA聚合酶扩增得到的PCR产物无3’-A碱基,不可直接用于TA克隆。

适合于:高保真扩增,快速扩增等。同时专门优化的高GC buffer可适用于高GC含量、具有复杂二级结构的模板的扩增。专门配备的Enhancer 2组分,有利于提高PCR扩增的特异性和扩增效率。


【保存条件】


-20保存,保质期24个月,避免反复冻融。


【注意事项】

  1. 50 μl的反应体系中SuperStar MAX超保真DNA聚合酶使用量为0.5-1 U。由于该酶强大的3’®5’的外切酶活性可降解引物,用酶量过多会导致引物部分或完全降解,电泳检测时产生弥散带型或无扩增产物。

  2. 采用本产品扩增,当引物长度大于20个碱基时,复性温度应设定为Tm+3;当引物小于20个碱基,复性温度应设定为最低的Tm值。由于该酶可以降解引物,建议使用引物终浓度为0.5 μM,如果需要可在0.2-1.0 μM之间,高于Taq酶扩增时采用的引物浓度。

  3. SuperStar MAX超保真DNA聚合酶具有极高的热稳定性,变性温度可以高于98。推荐使用的初始变性温度为98,变性时间为30 s

  4. 采用本产品扩增时,反应时应使用高品质的dNTPCat# A113,不推荐使用dUTP和其它可诱导产生dUTP或类似物的试剂。通常使用终浓度各为0.2 mMdNTP即可达到比较好的效果。

  5. 本产品扩增后的PCR产物经过纯化后,可直接与经去磷酸化的平末端目标载体连接,也可先连接到带有5’磷酸的线性平末端克隆载体上,如EZ-Blunt Blunt-end Ligation KitCat# T170),再经亚克隆转移至目标载体。如果需要与线性T载体连接,应先纯化再对PCR产物的3’端添加A碱基,加A反应可使用EZ-T A-Tailing KitCat# T173)。

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