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A091 2×SuperStar Max High-GC PCR Mix Loading Dye-free
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A091-01
1ml
420
999
420
A091-05
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1890
999
1890
A091-10
1ml×10
3360
999
3360

【产品概述】

本产品为预混的含有优化浓度的SuperStar Max超保真DNA聚合酶dNTPsMg2+GC反应缓冲液以及稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液,适用于对保真性要求高的DNA片段的快速扩增,如基因克隆、定点突变、SNP分析等,也可用于DNA片段的末端补平。本产品具有快速简便、灵敏度高、稳定性好等优点,使用时只需加入DNA模板和引物,并用水补足体积,可最大限度地减少人为误差、节约时间、降低污染几率。PCR产物无3’端突出碱基,不可直接用于TA克隆。

SuperStar Max超保真DNA聚合酶是在SuperStar Plus超保真DNA聚合酶基础上开发出来的高性能DNA聚合酶,本酶具有出色的扩增成功率和扩增效率。具有5’®3’ DNA聚合酶活性和3’®5’的外切酶活性(即校读活性),能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象。

产不含染料(无色),在PCR反应完成后,需添加上样缓冲液后进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。

适用于:高保真扩增,长片段快速扩增,如基因克隆、定点突变等。反应缓冲液专门针对高GC的模板或复杂二级结构的模板进行了优化,适合高GC含量、具有二级结构的复杂模板的扩增。


【保存条件】

-20保存,保质期24个月,避免反复冻融。


【注意事项】

  1. SuperStar Max超保真DNA聚合酶扩增时延伸速度约为15-30 s/kb,不要超过1 min/kb。应根据扩增产物的长度和模板的复杂性设置相应的延伸时间,复杂性较低时(例如:质粒、λDNA)可用15 s/kb的延伸时间;复杂性较高的基因组DNA模板,延伸时间则应为30 s/kb;对于有些cDNA模板,延伸时间可以增加到40 s/kb
  2. 用本产品扩增时,当引物长度大于20个碱基,复性温度应设定为Tm+3;当引物小于20个碱基,复性温度应设定为最低的Tm值。建议使用引物终浓度为0.5 μM,如果需要可在0.2-1.0 μM之间,高于Taq酶扩增时需要的引物浓度。
  3. SuperStar Max超保真DNA聚合酶具有极高的热稳定性,变性温度可以高于98。推荐使用的初始变性温度为98,变性时间为30 s
  4. 本产品扩增后PCR产物经过纯化后,可直接与经去磷酸化的平末端目标载体连接,也可先连接到带有5’磷酸的线性平末端克隆载体上(如EZ-Blunt Blunt-end Ligation KitCat# T170),再经亚克隆转移至目标载体。如果需要与线性T载体连接,应先纯化去除SuperStar Max DNA Polymerase后,再对PCR产物的3’端添加A碱基,加A反应可使用EZ-T A-Tailing KitCat# T173)。 
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