PCR(聚合酶链式反应)技术已成为分子生物学研究必备技能,DNA聚合酶是PCR能否成功的关键。从早期被发现的Taq DNA聚合酶到现在新酶的发现和对旧酶的改造,DNA聚合酶的保真性、特异性、灵敏度等都获得了明显的改进。
随着相关研究技术的深入和研究样本越发复杂,在基因克隆、二代测序、定点突变等实验中,都面临着更加严苛的PCR结果准确性要求。因此,对DNA聚合酶的保真性要求日益提高。超保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心,聚合中心具有5'→3'的DNA聚合酶活性,可沿 5'→3'方向催化合成 DNA;酶切中心具有3'→5'外切酶活性,即校正活性,可以进行碱基错配的修复,保证DNA复制的忠实性。
超保真DNA聚合酶工作原理示意图
PCR过程中错配的核苷酸会从聚合中心进入酶切中心被切除(图a、b);
切除后此位点会重新结合正确的核苷酸,继续从5’到3’进行精准复制(图c)。
超保真酶品类繁多,如何筛选一款适合自己的呢?
GenStar® SuperNova系列,性价比之王,专治超保真DNA聚合酶选择困难症。
GenStar® SuperNova系列五大特点
1、保真度超高:保真度是 Taq DNA Polymerase 的80倍;
2、延伸速度快:延伸速度约为 15-30 s/kb,不超过 1 min/kb;
3、扩增性能优:长片段扩增能力强,且可高效扩增复杂基因组模板和高 GC 模板;
4、模板适用性好:适用于多种物种来源模板的扩增;
5、应用范围广:适用于基因克隆、高通量测序、定点突变等;
优化的延伸因子,提高扩增速度和延伸性能
SuperNova DNA Polym-erase延伸速度约为 15-30 s/kb,简单模板扩增长度可达20 kb,复杂模板可达13 kb
SuperNova DNA Polymerase扩增效率高
复杂模板(如GC-rich)扩增能力强,可选择产品中配备的High-GC Enhancer,可进一步提高扩增效率
模板适用性广泛
适用于多物种来源模板的扩增,满足不同科研需求。